•Oksijen Radikali Absorbans Kapasitesi (,) Yöntemi
•Trolox Esdegeri Antioksidan Kapasite (TEAC) Yöntemi
•Toplam Fenolik Madde Tayini•MDA Olusumunun İnhibisyonu Yöntemi
•indirgeme Kuvveti (FRAP Yöntemi)
•Tiyosiyanat Metodu
•Floresans Sönme Zamanı Metodu ile Antioksidan Aktivite Tayini
•Toplam Antioksidan Güç (TAR) Tayin Metodu
Fenolik bilesiklerin Folin reaktifi ile alkali ortamda renkli kompleks
olusturur ve olusan mor-menekse renkli kompleksin 700 nm'de
maksimum absorbansının ölçülür.
Yöntem aslında bir antioksidan tayin yöntemidir.
•DPPH Radikali Temizleme Aktivitesi
DPPH radikali (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) 517 nm’de maksimum absorbans olusturmaktadır. Antioksidanlarla muamele, DPPH ’tan kaynaklanan mor rengin siddeti azalarak absorbansın düsüsüne sebep olacaktır.
DPPH konsantrasyonunu yarıya düsüren numune miktarı μg/mL cinsinden belirlenmekte ve IC50 degeri olarak ifade edilmektedir.
SERBEST RADiKALLER
Dıs yörüngelerinde eslesmemis bir elektrona sahip ve genellikle
elektriksel açıdan yüksüz atom yada moleküllerdir.
Elektron alıcı (yükseltgen) ya da elektron verici (indirgen) özelliklere
sahiptirler.
Baslıca sigara, alkol ve lipit metabolizması ürünleri, virüsler, günes
ısınları, X ısınları ve kozmik ısınlar, sanayi atıkları, otomobil egzoz
gazları, ozon, agır metaller, kirli su ve havadan olusabilmektedir.
Aynı zamanda aktive olmus fagositler, antineoplastikler
ve stres sonucu biyolojik olarak üretilirler
Radikal tepkimeleri basitçe üç basamakta meydana gelir:
Zincir Baslaması : X−X _ 2 X•
Zincir Gelismesi : R−H + X• _ R• + H−X
R• + X−X _ R−X + X•
Zincir Sonlanması: R• + X• _ R−X
R• + R• _ R−R
X• + X• _ X−X
Radikaller, oksijen içerip içermedigine göre, serbest oksijen radikalleri (SOR) ve
oksijen içermeyen radikaller olarak ikiye ayrılırlar.
Moleküler oksijen “biradikal”dir.
Oksijen radikalleri yaşalanma prosesleri ve birçok hastalığın sebebidir. Bundan dolayı antioksidan kimyasallar hem gıda hem de kozmetik sektöründe artış göstermektedir.
DPPH TESTİ
Metabolizma tarafından üretilen oksijen bağlı dokuların hücrelerinde serbest radikaller açığa çıkar. Radikaller mitokondride boldur ve yaklaşık 80 i mitokondrial süperoksidismutas tarafından parçalanır. Kalanları hücre sitosolleri içinde ortaya çıkar ve yeni radikallerin üretildiği catenation reaksiyonlarında diğer maddeler ile reaksiyona girereler. Bunlar mutasyona , hücer aynılaşmasına yada enzim yıkımına neden olabilirler. Free radikaller , alzaymır hastalıklarında, damarsertliği gibi pek çok hastalıkta önemli rol oynar.
Antioksidanler radikal zincir reaksiyonlarını bozabilen maddelerdir. Birçok bitki extraktları özellikle zengin polifenolik bileşenler içerenleranioksidatif etki gözterirler.
DPPH Radikali ile redoks reaksiyonlearından faydalanılan DPPH testi ile extraktların antioksidativ kapasitesi belirlenebilir. Radikal eşleşmemiş nitrojen elektronlarının sağladığı mor renktedir ve reaksiondan sonra radikal tutucunun oksijen atomu ile DPPH-H indirgenmesi ile sarı renk oluşur. Renk değişimi 517 nm ‘de spetrofotometrik olarak belirlenebilir.Bu yöntem ile bitki extraktlarının veya antioksidatif potansiyeli belirlenebilir.
Hiç yorum yok:
Yorum Gönder